示差折光檢測(cè)器屬于中等靈敏度濃度型檢測(cè)器，其響應(yīng)值取決于柱后流出液折射率的變化，采用含有樣品的流出液與不含樣品的流出液的同一物理量的示差測(cè)量。由于每種物質(zhì)都有各自的折射率，因此示差折光檢測(cè)器對(duì)所有物質(zhì)都有響應(yīng)，是一種通用型檢測(cè)器，具有廣泛的適用范圍。

在應(yīng)用開始前，使用流動(dòng)相沖洗樣品池和參比池。然后關(guān)閉參比池，讓溶劑僅從樣品池中流過。流動(dòng)相在兩個(gè)池中的示差折光相同，并且可以調(diào)整零點(diǎn)玻璃的位置，使檢測(cè)器可以達(dá)到光平衡，讓每個(gè)二極管獲得同樣的光線量。

光線自W燈經(jīng)過透鏡、狹縫之后，先后透過流通池的參比方（也叫參比池）、樣品方（也叫樣品池），再經(jīng)過反射到達(dá)終點(diǎn)——光電二極管，把光信號(hào)轉(zhuǎn)化成電信號(hào)。檢測(cè)器所輸出的信號(hào)值（基線），與A和B的能量差值有關(guān)，分析前要確保光斑處于在A和B的中間位置。

如果參比方和樣品方的成分是一樣，即光的折射角一致，光斑就會(huì)抵達(dá)光電二極管的中間位置，A和B信號(hào)差值為零，此時(shí)（歸零后）檢測(cè)器輸出的信號(hào)為零；如果樣品方的成分發(fā)生了變化，參比方和樣品方的成分變成不一致，兩者對(duì)光的折射角有差異，光斑即會(huì)落在光電二極管的偏A側(cè)或B側(cè)，檢測(cè)器會(huì)輸出一個(gè)明顯的+信號(hào)或-信號(hào)，即基線會(huì)變成正值或負(fù)值。

1.正確放置溶劑瓶和廢液瓶

要把溶劑瓶和廢液瓶放在比示差折光檢測(cè)器和容劑泵還要高的位置，這樣可以使樣品池有一定壓力，有利于優(yōu)化檢測(cè)器的性能。

2.示差折光檢測(cè)器不能用做梯度洗脫

由于介質(zhì)的改變和壓力的波動(dòng)都會(huì)影響基線的穩(wěn)定性，所以使用示差折光檢測(cè)器時(shí)不能進(jìn)行梯度洗脫。

3.保證檢測(cè)器的溫度恒定

光學(xué)系統(tǒng)和流動(dòng)相的溫度對(duì)基線的穩(wěn)定性影響很大。示差折光檢測(cè)器可在比室溫高5℃到55℃的范圍內(nèi)控溫。建議將溫度設(shè)為比室溫高5℃，并確保柱溫箱的溫度與檢測(cè)器保持一致。溫度不宜過高，因?yàn)榻橘|(zhì)的折光指數(shù)隨溫度升高而降低，溫度過高會(huì)使靈敏度降低。

4.不可讓流通池承受過大的壓力

示差折光檢測(cè)器流通池的反壓約為5bar，如果還要在系統(tǒng)里連接其他檢測(cè)器或餾分收集器，必須將它們連接在示差折光檢測(cè)器之前。即示差折光檢測(cè)器在流路系統(tǒng)里必須放在最后，如果還要在系統(tǒng)里增加一個(gè)檢測(cè)器，必須放在示差檢測(cè)器的前面，以防壓力增大時(shí)損壞流通池。

同時(shí)建議在運(yùn)輸或搬遷示差檢測(cè)器到其他場所時(shí)，流通池里最好裝有異丙醇，這是為避免在周圍環(huán)境溫度降低時(shí)使流通池破裂。

5.某些溶劑隨長時(shí)間存放而改變會(huì)造成基線的漂移

例如乙腈/水的混合物中乙腈的含量會(huì)降低，四氫呋喃會(huì)變成過氧化物，在吸濕性有機(jī)溶劑中的水量會(huì)增加，而保存在參比流通池中的溶劑如四氫呋喃會(huì)產(chǎn)生氣體。