做色譜分析的小伙伴們都知道，反相色譜（RP-HPLC）是應用最為廣泛的一種分離模式，它可以分析從低極性到中高極性的多數化合物，常用的鍵合相類型有C18、C8和苯基等。然而，反相色譜也有它的一個使用局限性：就是一些大極性化合物在常規(guī)反相中保留較弱，從而無法進行后續(xù)的定性與定量分析。

對此我們該采取什么樣的辦法呢？

首先，最容易想到的是通過增加流動相中水相的比例以減弱洗脫強度，從而增加極性化合物的保留。一般來說，分析物的極性越大，流動相中水的比例也需要更高。那么問題來了，對于一些常規(guī)的C18柱在高比例乃至純水相中耐受不好，很容易發(fā)生孔內干涸，也就是我們常說的“疏水塌陷"。一旦發(fā)生很容易出現色譜柱保留減弱等問題。